Cách chuẩn bị lam kính hiển vi

By
zemhe
-
0
21


Phiến kính hiển vi là những mảnh thủy tinh hoặc nhựa trong giữ mẫu để có thể quan sát mẫu dưới kính hiển vi ánh sáng . Có nhiều loại kính hiển vi khác nhau và cũng có nhiều loại mẫu vật khác nhau, vì vậy có nhiều cách để chuẩn bị một phiến kính hiển vi. Phương pháp được sử dụng để chuẩn bị một slide phụ thuộc vào bản chất của mẫu. Ba trong số các phương pháp phổ biến nhất là gắn ướt, gắn khô và bôi nhọ.

01
từ 05

Cầu trượt ướt

Đặt một giọt chất lỏng lên lam kính hiển vi

 Hình ảnh Tom Grill / Getty

Giá đỡ ướt được sử dụng cho các mẫu sống, chất lỏng trong suốt và mẫu thủy sinh. Chuẩn bị ướt giống như một chiếc bánh sandwich. Lớp dưới cùng là slide. Sau đây là mẫu chất lỏng. Một miếng thủy tinh hoặc nhựa trong suốt hình vuông nhỏ (lớp phủ) được đặt trên chất lỏng để giảm thiểu sự bay hơi và bảo vệ ống kính hiển vi khỏi tiếp xúc với mẫu.

Để chuẩn bị giá treo ướt sử dụng thanh trượt phẳng hoặc thanh trượt lõm:

  1. Nhỏ một giọt chất lỏng vào giữa phiến kính (ví dụ: nước, glycerin, dầu ngâm hoặc mẫu chất lỏng).
  2. Nếu bạn thấy một mẫu chưa có trong chất lỏng, hãy sử dụng nhíp để đặt mẫu vào bên trong giọt.
  3. Nghiêng một bên của tấm phủ sao cho mép của nó chạm vào tấm trượt và mép ngoài của giọt nước.
  4. Từ từ hạ tấm phủ xuống, tránh bọt khí. Hầu hết các vấn đề về bọt khí đều do không dán nghiêng lớp phủ, không chạm vào giọt chất lỏng hoặc sử dụng chất lỏng nhớt (đặc) . Nếu giọt chất lỏng quá lớn, lớp phủ sẽ nổi trên phiến kính, gây khó khăn cho việc lấy nét đối tượng bằng kính hiển vi.

Một số sinh vật sống di chuyển quá nhanh để có thể quan sát được trong điều kiện ẩm ướt. Một giải pháp là thêm một giọt chế phẩm thương mại có tên là “Proto Slow”. Một giọt dung dịch được thêm vào giọt chất lỏng trước khi phủ lớp phủ.

Một số sinh vật (chẳng hạn như Paramecium ) cần nhiều không gian hơn không gian được hình thành giữa lớp phủ và phiến phẳng. Thêm một vài sợi dây cotton từ khăn giấy hoặc Q-tip hoặc thêm các mảnh nhỏ của lớp phủ bị hỏng sẽ tạo thêm không gian và “bọc” các sinh vật.

Khi chất lỏng bay hơi từ các cạnh của phiến kính, các mẫu sống có thể chết. Một cách để làm chậm quá trình bay hơi là sử dụng một cây tăm để phủ lên các cạnh của lớp phủ một lớp thạch dầu mỏ mỏng trước khi thả lớp phủ lên mẫu. Ấn nhẹ nắp trượt để loại bỏ bọt khí và bịt kín phiến kính.

02
từ 05

Cầu trượt khô

Một nhà khoa học cắt mẫu vật thành nhiều mảnh nhỏ để sử dụng trong các phiến kính khô

Wladimir Bulgar/Thư viện ảnh Khoa học/Hình ảnh Getty

Các phiến kính gắn khô có thể bao gồm một mẫu vật được đặt trên một phiến kính hoặc một mẫu vật được phủ một lớp phủ. Đối với kính hiển vi công suất thấp, chẳng hạn như máy nội soi phân tích, kích thước của vật thể không quan trọng vì bề mặt của nó sẽ được kiểm tra. Đối với kính hiển vi phức hợp, mẫu phải rất mỏng và càng phẳng càng tốt. Nhắm mục tiêu độ dày ô cho một vài ô. Có thể cần dùng dao hoặc lưỡi lam để cạo một phần mẫu.

  1. Đặt slide trên một bề mặt phẳng.
  2. Dùng nhíp hoặc kẹp để đặt mẫu lên phiến kính.
  3. Đặt tấm phủ lên trên mẫu. Trong một số trường hợp, bạn có thể xem mẫu mà không cần nắp đậy, miễn là cẩn thận để không va đập mẫu vào thấu kính hiển vi. Nếu mẫu mềm, có thể tạo ra một “tấm trượt bị đè bẹp” bằng cách ấn nhẹ vào tấm phủ.

Nếu mẫu không còn trên phiến kính, có thể đảm bảo bằng cách sơn phiến kính bằng sơn móng tay trong suốt ngay trước khi thêm mẫu. Điều này cũng làm cho slide bán vĩnh viễn. Các phiến kính thường có thể được rửa sạch và tái sử dụng, nhưng việc sử dụng sơn móng tay có nghĩa là các phiến kính phải được làm sạch bằng nước tẩy sơn móng tay trước khi sử dụng lại.

03
từ 05

Cách làm lam kính lam máu

Phiến kính nhuộm máu với vết tím Leishman-Giemsa trong phòng thí nghiệm huyết học

Hình ảnh Arindam Ghosh/Getty

Một số chất lỏng có màu quá đậm hoặc quá đặc để có thể nhìn thấy bằng kỹ thuật gắn ướt. Máu và tinh dịch được chuẩn bị dưới dạng vết bẩn. Làm mờ mẫu đều trên slide cho phép phân biệt các tế bào riêng lẻ. Mặc dù tạo vết bôi không phức tạp, nhưng để có được một lớp đều cần phải thực hành.

  1. Nhỏ một giọt mẫu chất lỏng lên lam kính.
  2. Thực hiện một slide sạch thứ hai. Giữ nó ở một góc với slide đầu tiên. Sử dụng cạnh của slide này để chạm vào giọt nước. Hoạt động mao dẫn sẽ kéo chất lỏng đến một đường mà cạnh phẳng của lam thứ hai chạm vào lam thứ nhất. Vẽ đều slide thứ hai trên bề mặt của slide đầu tiên, tạo ra một vết nhòe. Không cần phải áp dụng áp lực.
  3. Tại thời điểm này, để cho phiến kính khô để có thể nhuộm hoặc đặt một phiến kính phủ lên trên vết bôi.
04
từ 05

Làm thế nào để nhuộm slide

Một chồng tiêu bản nhuộm chuẩn bị cho mô bệnh học (nhuộm H và E).

Hình ảnh MaXPdia/Getty

Có nhiều phương pháp để nhuộm tiêu bản. Các điểm giúp bạn dễ dàng xem các chi tiết mà nếu không sẽ không nhìn thấy được.

Các vết bẩn đơn giản bao gồm iốt, pha lê tím hoặc xanh metylen. Các giải pháp này có thể được sử dụng để tăng độ tương phản trong chế phẩm ướt hoặc khô. Để sử dụng một trong những vết bẩn này:

  1. Chuẩn bị một slide ướt hoặc một slide khô với một lớp phủ.
  2. Thêm một giọt vết bẩn nhỏ vào một cạnh của lớp phủ.
  3. Đặt cạnh của khăn giấy hoặc khăn giấy lên cạnh đối diện của tấm phủ. Hoạt động mao dẫn sẽ đẩy thuốc nhuộm qua phiến kính để nhuộm mẫu.
05
từ 05

Các đối tượng phổ biến để kiểm tra dưới kính hiển vi

Kính hiển vi và các vật dụng liên quan được các nhà khoa học sử dụng hàng ngày, bao gồm lam kính hiển vi và nhíp.

Hình ảnh Carol Yepes / Getty

Nhiều loại thực phẩm và đồ vật phổ biến tạo nên các chủ đề slide hấp dẫn. Trượt ướt là tốt nhất để cho ăn. Các thanh trượt khô rất tốt cho hóa chất khô. Ví dụ về các chủ đề thích hợp bao gồm:

  • Muối ăn
  • muối epsom
  • phèn chua
  • Nước rửa chén dạng bột
  • Đường
  • Bánh mì hoặc khuôn trái cây
  • Những lát trái cây hoặc rau củ mỏng
  • Lông người hoặc lông thú cưng
  • Ao
  • Đất vườn (làm băng ướt)
  • sữa chua
  • Bụi